|
|
Assay for testing inhibitors of α-synuclein amyloid fibril formation in cells
Galkin, Maksym ; Yushchenko, Dmytro (vedoucí práce) ; Hudeček, Jiří (oponent) ; Schneider, Bohdan (oponent)
Parkinsonova nemoc (PD) je celosvětově druhým nejčastějším neurodegenerativním onemocněním a dosud není vyléčitelná. Během PD je progresivní ztráta neuronů doprovázena tvorbou Lewyho tělísek - abnormálních intracelulárních agregátů, které jsou většinou tvořeny fibrilami proteinu α- synukleinu (αSyn) neuronech. Bylo zjištěno, že agregace αSyn koreluje s progresí PD. Slibným přístupem k léčbě onemocnění by tedy byla inhibice agregace αSyn a jejího následného patologického šíření. V předchozích letech byla vyvinuta široká škála inhibitorů agregace αSyn, včetně malých molekul, protilátek a proteinů cílících na konce fibril αSyn. Zatímco tyto inhibitory byly důkladně testovány v roztocích, jejich účinnost v testech na buňkách zůstala nejasná. Hlavním důvodem byla absence spolehlivého vysoce účinného testu pro hodnocení agregace αSyn v buňkách. Takový test je zvláště důležitý pro testování molekul cílících na amyloidní fibrily uvnitř buněk kvůli nespecifické a nežádoucí interakci s jinými buňčnými proteiny bohatými na β-list. Kromě toho může být aplikace inhibitorů značně omezena kvůli špatné penetraci přes buněčnou membránu a intracelulární degradaci. Hlavním cílem mé práce byl vývoj testu vhodného pro hodnocení účinnosti inhibitorů agregace αSyn v buněčném prostředí. Tento test by měl být schopen...
|
|
|
Development of inhibitors of amyloid fibril formation
Priss, Anastasiia ; Yushchenko, Dmytro (vedoucí práce) ; Schneider, Bohdan (oponent) ; Hudeček, Jiří (oponent)
α-Synuklein (α-Syn) je malý protein, který je přítomen v synapsích neuronů, kde pravděpodobně reguluje vezikulami zprostředkované uvolňování neurotransmiterů. Chybné poskládání α-Syn do amyloidních fibril je spojeno s progresí tzv. synukleinopatií, včetně Parkinsonovy choroby, což je druhá nejčastější neurodegenerativní porucha. Přes veškeré úsilí není dosud k dispozici léčba Parkinsonovy choroby, která by zastavila nebo zpomalila neurodegeneraci. Při hledání potenciálních kandidátů na léky bylo nalezeno několik přímých a nepřímých postupů jak ovlivnit agregaci α-Syn. Jednou z nejslibnějších strategií je nedávno popsaná inhibice růstu fibril α-Syn blokováním jejich konců. Tento přístup otevřel cestu k návrhu inhibitorů fibrilizace, které by byly efektivní při nízkých koncentracích. Nicméně racionální design takových inhibitorů dosud nebyl proveden. Cílem této práce je vývoj vysoce účinných a specifických inhibitorů fibrilizace α-Syn. Proto byla provedena pečlivá analýza vztahu mezi strukturou a aktivitou inhibitorů blokujících konec fibril. Klíčovým faktorem pro inhibiční aktivitu byla definována afinita inhibitoru ke konci fibrily. Pomocí současných znalostí struktury fibril jsme navrhli inhibitory, které jsou schopné vázat se na konce fibril s afinitou o řád vyšší než má monomer α-Syn. Tyto...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.